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誰知道革蘭染色發(fā)明的歷史小故事?

革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法,1884年由丹麥醫(yī)師、細菌學家 Christain Gram創(chuàng)立。
細菌先經(jīng)堿性染料結晶染色,而經(jīng)碘液媒染后,用酒精脫色,在一定條件下有的細菌此色不被脫去,有的可被脫去,因此可把細菌分為兩大類,前者叫做革蘭氏陽性菌(G+),后者為革蘭氏陰性菌(G—)。為觀察方便,脫色后再用一種紅色染料如堿性蕃紅等進行復染。陽性菌仍帶紫色,陰性菌則被染上紅色。有芽胞的桿菌和絕大多數(shù)和球菌,以及所有的放線菌和真菌都呈革蘭氏正反應;弧菌,螺旋體和大多數(shù)致病性的無芽胞桿菌都呈現(xiàn)負反應。革蘭氏陽性菌對青霉素敏感,革蘭氏陰性菌對鏈霉素敏感??筛鶕?jù)革蘭氏染色法鑒別不同菌種并對癥下藥。
革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌在化學組成和生理性質(zhì)上有很多差別,染色反應不一樣?,F(xiàn)在一般認為革蘭氏陽性菌體內(nèi)含有特殊的核蛋白質(zhì)鎂鹽與多糖的復合物,它與碘和結晶紫的復合物結合很牢,不易脫色,陰性菌復合物結合程度底,吸附染料差,易脫色,這是染色反應的主要依據(jù)。 另外,陽性菌菌體等電點較陰性菌為低,在相同PH條件下進行染色,陽性菌吸附堿性染料很多,因此不易脫去,陰性菌則相反。所以染色時的條件要嚴格控制。例如,在強堿的條件下進行染色,兩類菌吸附堿性染料都多,都可呈正反應;PH很低時,則可都呈負反應。此外,兩類菌的細胞壁等對結晶紫—碘復合物的通透性也不一致,陽性菌透性小,故不易被脫色,陰性菌透性大,易脫色。所以脫色時間,脫色方法也應嚴格控制。
革蘭氏染色原理:
G+菌:細胞壁厚,肽聚糖網(wǎng)狀分子形成一種透性障,當乙醇脫色時,肽聚糖脫水而孔障縮小,故保留結晶紫-碘復合物在細胞膜上。呈紫色。
Gˉ菌:肽聚糖層薄,交聯(lián)松散,乙醇脫色不能使其結構收縮,其脂含量高,乙醇將脂溶解,縫隙加大,結晶紫-碘復合物溶出細胞壁,沙黃復染后呈紅色。
革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟,具體操作方法是:
1)涂片固定。在無菌操作條件下,用接種環(huán)挑取少量細菌于干凈的載玻片上涂布均勻,固定。
2)草酸銨結晶紫染1分鐘。
3)自來水沖洗,去掉浮色。
4) 用碘-碘化鉀溶液媒染1分鐘,傾去多余溶液。
5)用中性脫色劑如乙醇或丙酮酸脫色,革蘭氏陽性菌不被褪色而呈紫色,革蘭氏陰性菌被褪色而呈無色。
6)用蕃紅染液復染1分鐘,革蘭氏陽性菌仍呈紫色,革蘭氏陰性菌則呈現(xiàn)紅色。革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌即被區(qū)別開。
為了研究細菌的形態(tài),微生物學家發(fā)明了對細菌的染色,有用一種染色劑的稱單染,僅能對細菌形態(tài)觀察。用兩種以上的稱復染,革蘭氏發(fā)明了復染色法;先后用兩種染色劑和媒染劑、脫色劑組合,由此而命名為革蘭染色。
革蘭染色不僅可以觀察細菌的形態(tài),同時將細菌分為兩大類。一類是染色陽性菌是紫色,另一類染色陰性的是紅色。
由于細菌的結構上的差異,形成了不同的染色效果。了解染色性能有助于臨床用藥和細菌的鑒定;
如青霉素對革蘭染色陽性菌有效,當化膿性細菌感染可首選藥物。而氟哌酸對革蘭染色陰性桿菌有效,如腸道病、腹瀉為常用藥。
當從尿道培養(yǎng)出革蘭陰性雙球菌,可以作為淋病感染的重要指癥。如出現(xiàn)革蘭染色陽性的葡萄球菌,又可作為金黃色葡萄球菌感染依據(jù)

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